Liposomal formulations of mistletoe produced by centrifugal technologies and cell proliferation analysis of both mistletoe extracts and isolated mistletoe lectin I = Liposomale Formulierung von Mistelextrakten durch Zentrifugationsverfahren und Analyse der Zellproliferation von Gesamtextrakten und isoliertem Mistellektin I

Um Liposomen aus Nanoemulsionen herzustellen, wird ein Zentrifugationsverfahren entwickelt, das eine hohe Einkapselungseffizienz und asymmetrische Membranen ermöglicht. Heparin-Komplexe werden für die Bildung einer stabilen Schutzschicht verwendet. Um die Erprobung der liposomalen Formulierungen in vitro und in vivo zu ermöglichen, wurden Mistelpräparate mit unterschiedlicher Viscotoxin-(VT) und Mistellektin-(ML) Zusammensetzung sowie isoliertes ML°I an Maus-Zelllinien erprobt. Ein Proliferationstest wurde durchgeführt, um die inhibierenden Konzentrationen (IC50) zu ermitteln und sensitive Zelllinien für in vivo Experimente auszuwählen. ... mehrabnobaVISCUM (AV) Pini Präparate, die den geringsten Gesamtgehalt an ML und eine Dominanz von ML III aufweisen, zeigten bei B16-F10 Melanomzellen eine stärkere Inhibierung der Proliferation im Vergleich zu den ML I reichen Präparaten AV Fraxini und Quercus. Für AV Fraxnini und AV Quercus wurde gezeigt, dass die Zytotoxizität überwiegend auf ML I zurückzuführen ist und ML I daher als potentieller Wirkstoff zur Verkapselung in Liposomen geeignet ist. Auf isoliertes ML I reagiert die getestete Kolonkarzinomzelllinie C26 deutlich empfindlicher als die aggressive B16-F10 Melanomzelllinie. Diese Ergebnisse erlauben den Vergleich eines sensitiven mit einem aggressiven Tumormodell in vivo. Im Vergleich zu C26 ist die Makrophagenzelllinie RAW264.7 relativ unempfindlich gegenüber isoliertem ML I. Die Ergebnisse deuten auf die Möglichkeit einer gezielten Therapie von z.B. Kolontumoren hin, bei der die Immunfunktionen intakt bleiben.

A centrifugal technology is under development to produce liposomes from a nanoemulsion and to enable high encapsulation efficiencies in asymmetric membranes. Heparin complexes are used for a robust protective coating of liposomes. To enable in vitro and in vivo testing of liposomal formulations, mistletoe preparations with differences in viscotoxin (VT) and mistletoe (ML) lectin composition were tested on murine cell lines. A proliferation assay was performed to determine the half maximal inhibitory concentration (IC50) and select sensitive cell lines for in vivo experiments. ... mehrabnobaVISCUM (AV) Pini preparations, with the lowest total ML content and a ML°III dominated composition, showed a stronger inhibition of proliferation on B16-F10 (mouse melanoma) cells relative to the total ML content compared to AV Fraxini and Quercus. ML I is the major cytotoxic component in AV Fraxini and AV Quercus and therefore a potential API for encapsulation in liposomes. The tested colon carcinoma cell line C26 is significantly more sensitive to isolated ML I than the aggressive B16-F10 melanoma cell line. In regard to animal models, this allows to compare a sensitive to a relatively non-sensitive and more aggressive tumor cell line. In comparison to C26, the macrophage cell line RAW264.7 is relatively insensitive to isolated ML I, suggesting the possibility of selecting therapeutic concentrations that target e.g. colon tumours, but leave immune functions intact.