Demonstration video of the automated section acquisition for Array Tomography

Das Video zeigt die automatisierte Schnittaufnahme von seriellen Ultramikrotomschnitten durch eine neue Methodik, welche mikrofluidische Kanäle einsetzt. Die Fluidkanäle bilden ein mikrofluidisches System mit niedriger Reynolds-Zahl, in dem sich die Kanäle und das Substrat gemeinsam bewegen. Die Kanäle entstehen durch eine Oberflächenfunktionalisierung des Substrats, die eine unterschiedliche Benetzbarkeit bewirkt.
Die Schnittaufnahme erfolgt in einem Zyklus von 4 Schritten. (1) Der Anfang des Schnittbandes wird innerhalb eines mikrofluidischen Kanals positioniert und die natürliche Bewegung der Formation des Schnittbandes schiebt die Schnitte innerhalb des Kanals. ... mehr(2) Das Schnittband wird von der Diamandschneide gelöst und die Rückwärtsbewegung des Substrats für zur kompletten Abtrennung. (3) Eine dünne vorstehende Folie aus FEP schiebt das Schnittband komplett in den Kanal. (4) Das Substrat bewegt sich zur Seite um die Aufnahme eines weiteren Schnittbandes zu ermöglichen und der Zyklus beginnt von vorne.
Durch langsames Anheben des Substrats aus der Messerwanne setzen sich die Schnitte auf der Substratoberfläche ab und werden dauerhaft fixiert. Die so erzeugten Schnitte können auf den für Array Tomography üblichen Substraten abgelegt und somit mit einer Vielzahl von mikroskopischen Verfahren untersucht werden.

The video shows the automated section acquisition of serial ultramicrotome sections by a new methodology that uses microfluidic channels. The fluid channels are a microfluidic system with low Reynolds number in which sections and substrate move in unison. The fluid channels form by surface functionalization of the carrier substrate surface, which causes areas of different wettability.
The sections are collected in a cycle of 4 steps. (1) The beginning of the section ribbon is positioned inside a microfluidic channel and the natural motion during the formation of the section ribbon pushes the sections inside the channel. ... mehr(2) The section ribbon is released from the diamond knife edge and the backward movement of the substrate causes a complete separation. (3) A thin protruding foil of FEP pushes the section ribbon completely into the channel. (4) The substrate moves to the side to accommodate another section ribbon and the cycle starts again.
By slowly lifting the substrate out of the knife trough, the sections settle on the carrier substrate and become permanently fixed. The sections acquired by this novel method can be deposited on substrates commonly used for Array Tomography and thus examined by a variety of microscopic techniques.